dsRNA（double-stranded RNA），双链RNA在细胞内诱导同源序列的基因表达受抑的现象称为RNA干扰。

dsRNA 可以通过注射、电穿孔和化学试剂介导的转染等方式介入动物和细胞内。dsRNA的制备是实施RNAi较为关键的一步。目前常用的dsRNA制备方法主要有2 种：体外转录法和体内载体表达法。其中体外转录法合成dsRNA可以在预期的PCR产物两端连上转录起始点(如T7、SP6等)，先用RNA聚合酶转录合成单链RNA, 再互补成dsRNA。

相比而言，要制备大量的dsRNA，采用体内载体表达法即构建质粒，在细菌体内表达更为经济高效。带有发夹环的dsRNA包括2个反向互补的靶序列片段，中间插入一个单链环。通常构建这样的DNA模板，需要3步连接（3步克隆法）实现，这种方法操作较为繁琐。

长链dsRNA设计合成流程：
1. 通过数据库同源比对方法选取合适的目的基因序列
2. 目的基因序列的克隆
3. 向目的基因上加入接头，可使用的接头有T7，T3，SP6。
4. 体外反转录及双链RNA退火。
5. 测定浓度。