实时荧光定量PCR技术是DNA定量技术的一次飞跃。运用该项技术，我们可以对 DNA、RNA样品进行定量和定性分析。定量分析包括绝对定量分析和相对定量分析。前者可以得到某个样本中基因的拷贝数和浓度；后者可以对不同方式处理的两个样本中的基因表达水平进行比较。除此之外我们还可以对PCR产物或样品进行定性分析。

相对定量：采用2–⊿⊿CT法计算检测目的基因的相对表达量。通过预实验优化引物条件。

绝对定量：建立标准品标准曲线，检测样本中的目的基因，通过与标准曲线比对，得到检测目的基因的准确拷贝数，模板DNA浓度越高，荧光达到阈值的循环数越少，即Ct值越小，Log浓度与循环数呈线性关系，通过已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线，根据样品Ct值，就可以计算出样品中所含的模板量。

目前实时荧光定量 PCR 技术已经被广泛应用于基础科学研究，临床诊断，疾病研究以及药物研发等领域。

1.科学研究
医学、农牧、生物相关分子生物学定量研究。

2. 临床疾病诊断
各型肝炎、艾滋病、禽流感、结核、性病等传染病诊断和疗效评价；地中海贫血、血友病、性别发育异常、智力低下综合症、胎儿畸形等优生优育检测；肿瘤标志物及瘤基因检测实现肿瘤病诊断；遗传基因检测实现遗传病诊断。

3.动物疾病检测
禽流感、新城疫、口蹄疫、猪瘟、沙门菌、大肠埃希菌、胸膜肺炎放线杆菌、寄生虫病等、炭疽芽孢杆菌。

4.食品安全
食源微生物、食品过敏源、转基因、乳品企业阪崎肠杆菌等检测。