抗体修饰
抗体标记服务主要有生物素、HRP、胶体金和荧光素分子标记等。生物素标记是通过化学反应将生物素共价结合到抗体分子上,主要应用在蛋白芯片分析、ELISA等酶联免疫实验中;
抗体标记服务主要有生物素、HRP、胶体金和荧光素分子标记等。生物素标记是通过化学反应将生物素共价结合到抗体分子上,主要应用在蛋白芯片分析、ELISA等酶联免疫实验中;
抗体库技术的主导思想是将某种动物的所有抗体可变区基因克隆在质粒或噬菌体中表达,利用不同的抗原筛选出携带特异抗体基因的克隆,从而获得相应的特异性抗体。
抗体检测的方法众多,除传统的沉淀反应,凝集试验,补体结合试验外,标记免疫测定(如酶联免疫测定、放射免疫测定、荧光免疫测定、发光免疫测定等)已成为主要的免疫测定技术,免疫印迹法也发挥了明显的作用,一些快速测定法(如快速斑点免疫结合试验)也被广泛使用。
抗体蛋白测序是简单地定义未知抗体的氨基酸序列。质谱技术在抗体蛋白重新测序中的应用使得在没有可用细胞系或事先不知道DNA序列的情况下进行这项工作成为可能。
基因工程抗体又称重组抗体,是指利用重组DNA及蛋白质工程技术对编码抗体的基因按不同需要进行加工改造和重新装配,经转染适当的受体细胞所表达的抗体分子。
禽类机体受到外界的抗原刺激后,法氏囊内的B细胞分化成为浆细胞,分泌特异性抗体进入血液循环,当血液流经卵巢时,特异性抗体在卵细胞中逐渐蓄积,形成卵黄抗体。
目前,解析蛋白三维结构常见的方法有X射线蛋白晶体衍射技术、核磁共振技术和低温冷冻电镜技术。X射线蛋白晶体衍射技术是利用X射线在晶体物质中的衍射效应进行物质结构分析的技术 。
现阶段测定蛋白质三维结构的方法主要有 X 射线晶体衍射分析,电镜三维重构技术以及核磁共振技术。核磁共振(Nuclear magnetic resonance)是指原子核在外加恒定磁场作用下产生能级分裂,从而对特定频率的电磁波发生共振吸收的现象。
分子量是蛋白质关键特征参数之一,也是有机化合物最基本的理化性质参数。分子量正确与否往往代表着所测定的有机化合物及生物大分子的结构正确与否。
蛋白电泳作为一种蛋白质的分析技术,蛋白质在缓冲液中带负电荷或正电荷,在电场中向阳极移动称为电泳,不同的蛋白质分子具有不同的电泳迁移率。
蛋白质是生命有机体的主要成分,在生命体生长发育的各个阶段都起着重要作用。所以分离和检测蛋白质一直是人们研究的热点。目前,HPLC技术广泛地应用于蛋白质的分离和检测。
单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体,称为单克隆抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。
蛋白表达系统有很多种,比较常用的有原核表达系统(大肠杆菌)和真核表达系统(如酵母、昆虫细胞或者哺乳动物细胞)。随着蛋白药物市场的快速发展和蛋白质组学研究的深入,高纯度的活性蛋白的需求量越来越大。
蛋白质因受某些物理或化学因素的影响,分子的空间构象被破坏,从而导致其理化性质发生改变并失去原有的生物学活性的现象称为蛋白质的变性作用(denaturation)。
合成多肽作为目前成本最低抗原肽模拟技术已经在免疫制备抗体行业广泛被接受, 大量被用于模拟制造识别大生物分子的抗体的基本原料, 特别是在制备甲基化抗体, 磷酸化抗体和糖基化抗体方面, 这项技术具有不可比拟的优势。
酵母表达系统兼有原核和高等真核系统的优点,已广泛用于外源蛋白的表达, 其优势表现在:1. 表达水平高,既可在胞内表达,又可分泌型表达;
昆虫细胞表达系统是四大表达系统(昆虫细胞、细菌、酵母、哺乳动物细胞表达系统)之一。昆虫细胞表达系统原理是通过转座作用将转移载体中的表达组件定点转座到能在大肠杆菌中增殖的杆状病毒穿梭载体(Bacmid)上,通过抗性和蓝白斑筛选到重组穿梭质粒,
蛋白表达系统是指由宿主、外源基因、载体和辅助成分组成的体系。通过这个体系可以实现外源基因在宿主中表达的目的。一般由以下几个部分组成: