技术概述
抗体库技术的主导思想是将某种动物的所有抗体可变区基因克隆在质粒或噬菌体中表达,利用不同的抗原筛选出携带特异抗体基因的克隆,从而获得相应的特异性抗体。
抗体库技术不仅可以模拟动物免疫系统产生抗体的过程,还具有许多独特的优点,令杂交瘤技术难以相比。抗体库技术无需免疫,从理论上讲,10^6~10^8的库容就可能包容所有的抗体。利用抗原即可直接从非免疫动物抗体库中筛选出特异性抗体,并能筛选到针对该物种自身抗原的抗体。从人的抗体库中可以得到完全是人源的McAb,克服了难以用杂交瘤技术获得人源McAb的障碍。此外,由于细菌细胞增殖快,培养成本低廉,利于大量制备高纯度抗体,进行蛋白晶体结构研究和应用。因此,抗体库技术将对生物学和医学的发展起着重要的推动作用。
抗体库技术由组合抗体库迅速发展到噬菌体抗体库技术。
噬菌体抗体库项技术是抗体库技术的一个突破性进展,它在筛选时检测的不是细菌克隆的可溶性表达产物,而是噬菌体载体转化细菌后,融合表达在噬菌体颗粒表面上的Fab或scFV。称为噬菌体抗体。通过多轮的抗原吸附-洗脱-扩增,最终筛选到的所需的抗体克隆,从而大大简化了筛选过程。筛选到的噬菌体抗体克隆可应用插人琥珀突变子及不能通读琥珀突变的受体菌获得可溶性的Fab 或scFV。
技术详情
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