技术概述
致癌试验,是检验外来环境因素或化合物及其代谢物是否具有诱发癌或肿瘤(包括恶性肿瘤(癌)和良性肿瘤)作用的试验。能诱发恶性或良性肿瘤的物质,称为致癌物。
致癌试验一般可分为短期快速筛检法和长期致癌试验。
1. 短期快速筛检法
较常用方法如下:
(1)致突变试验法:在许多致突变试验方法中,艾姆斯法(Ames test)最为常用,其理论根据为体细胞突变是致癌作用的基础。根据艾姆斯法试验结果,证实至少有80%的已知致癌物具有致突变作用,但也有不致突变的致癌物(如石棉纤维)和不致癌的致突变物。由于本法简便、灵敏,结果较为可靠,是目前最普遍使用的一种致癌物快速筛检法。
(2)哺乳动物细胞体外转化试验:将哺乳动物细胞株于体外与受试物接触,如受试物有致癌作用,可使正常细胞在形态与生理特性方面发生变化并与癌细胞相似。此种过程称为转化,已发生转化的细胞称为转化细胞。细胞转化并非形成肿瘤,但表示受试物可能具有致癌作用,并可用于致癌物的筛检。根据目前经验将艾姆斯试验与细胞体外转化试验结合使用,可筛检出98%以上的致癌物。
(3)DNA修复合成试验:常用方法有程序外DNA合成试验。DNA受损后,发生在正常复制合成期(S期)以外DNA的修复合成,称为程序外DNA合成(UDS)或DNA修复合成。3H-胸苷(3H-dT)掺入量法,可以反映DNA修复合成情况:3H-dT可掺入正在复制的DNA分子中,使其带有放射性标记。将受试细胞分裂阻断同步化于G1期,再用羟基脲抑制残存的S期半保留DNA复制,放射自显影法和液闪计数法确定3H-胸苷掺入量。
2.长期致癌试验
多于哺乳动物中进行,一般多用大鼠、小鼠等啮齿动物,如条件许可,尚可于狗和猴等一种非啮齿动物中进行。用完整哺乳动物进行的长期致癌试验结果可靠,但试验过程较长,不能在较短时间内得出结论,费用也较高,故近年来有许多短期快速方法正在发展。
技术详情
参考文献
[1]高羚喻,吴纯启,廖明阳,王全军.药物中、短期致癌试验的研究进展[J].中南药学,2011,9(03):231-233.
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动物致癌试验的判断标准?