技术概述
FISH(fluorescence in situ hybridization)技术是一种重要的非放射性原位杂交技术。该方法在80年代末 被发明,现已从实验室逐步进入临床诊断领域。
基本原理是将核酸探针的某一种核苷酸标记上报告分子如生物素、地高辛,在变性后与已变性的靶核酸在退火温度下复性;利用该报告分子与荧光素标记的特异亲和素之间的免疫化学反应,通过荧光显微镜观察荧光信号可在不改变被分析对象(即维持其原位)的前提下对靶核酸进行分析。DNA荧光标记探针是其中最常用的一类核酸探针。利用此探针可对组织、细胞或染色体中的DNA进行染色体及基因水平的分析。荧光标记探针不对环境构成污染,灵敏度能得到保障,可进行多色观察分析,因而可同时使用多个探针,缩短因单个探针分开使用导致的周期过程和技术障碍。
技术详情
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