新冠病毒分子检测只要5分钟！雅培 ID NOW平台技术大揭秘
来源：百度 | 作者：星哥谈IVD| 时间：2020-3-30
有观点，有态度
这是医业观察公众号的第677-2期文章
作者：丁朗焜
来源：科技老丁哥
雅培 ID NOW平台来自并购的Alere i平台。
Alere i测试盒的检测流程和内部结构
1 检测流程
作为之前全球知名POCT厂商（2017年53亿美元被雅培并购），美艾利尔（Alere）公司有很多明星产品，下面焜哥将带领大家解剖该公司旗下的Alere I检测测试盒，但在动手研究之前，请各位看官回忆一下曾经在实验室中做过的无数次重复性动作：取样-加样-检测。
虽然各位眯着眼睛就能做出这一实验基本动作，但焜哥还是打算简单讲解一下，因为这一动作就是Alerei检测测试盒的基本操作原理。
该基本动作为：1，将待测样品加入到离心管A中；2，用移液枪取一定体积待测样品加入到离心管B中，该离心管中有反应所需的各种试剂；3，将离心管B放入检测仪器中进行反应，如PCR扩增仪等，反应一段时间后通过仪器检测得出结果。
虽然Alere公司在专利CN201510472452，WO2013041713和WO2017075586中公开了i检测测试盒的工作原理和内部结构，但专利内容却晦涩难懂，经过焜哥的抽丝剥茧，终于恍然大悟，原来这个测试盒的工作原理就是曾经重复多次的取样-加样-检测步骤。如下为Alere i检测仪器和测试盒。
图2.1 Alere i检测仪器和测试盒。
实际上，为了便于理解，各位完全可以将Alere i检测仪器类比于PCR扩增仪，其功能也类似。而测试盒则主要有三部分组成，但为了通俗易懂，焜哥并没有按照专利中的英文直接翻译过来，而是根据其具体功能来命名各个部分，如上图中所示的，中间蓝色管为样品管，其功能相当于前面提到的离心管A；黄色管为扩增管，相当于离心管B；白色管为转移管，功能则相当于移液枪。
在理解该测试平台的各部分具体功能之后，各位就很容易想到Alere i的检测流程，如下图所示，该具体检测流程和上面提到的取样-加样-检测几乎完全一样。如下图中的BASE为扩增管，RCVR为样品管，CARTRDG为转移管。
图2.2 Alere i测试平台的具体检测流程。
2 内部结构
Alere公司的专利CN201510472452和WO2013041713中公开了i检测测试盒的内部结构，如下所示分别为转移管，扩增管，样品管的内部结构。最左边的转移管的基本结构为弹簧活塞结构，在按下去后会压缩内部气体并将伸长下面的枪头，中间的扩增管中最重要的结构是微型管，里面包含有核酸扩增所需要的各种试剂，这些试剂是以固体粉状形式存在，上面的密封组件适合转移管接触的部位，起到密封的作用。最右边的样品管中的重要结构是样品处理腔，其内部有样品处理所需的液体试剂，比如细胞裂解液等，这些试剂是以液体状存在，故而需要密封。
图2.3 Alere i测试盒各部分的内部结构。
虽然上图讲明了各部分的基本结构，但各结构之间的配合操作却很难从上图看出。幸好，专利中还公开了各部分之间的配合操作，比如下图展示了转移管从样品管中吸取一定量的样品的过程，图中红色框内是活动部件，在按下转移管后，转移管会和下方的样品管配合起来，如中间图。继续按下转移管会听见“咔擦”一声，代表转移管完全深入到样品管内，此时为最右边图中的状态，即液体样品被吸入到转移管内。
图2.4 转移管从样品管中吸取样品的过程。
如下图为将吸取有样品的转移管放入到扩增管上的情形，通过挤压转移管，可以将扩增管中微型管上面的密封膜戳破，并将转移管内部的样品推入到扩增管内，此时即完成了手动操作步骤，后期的恒温扩增反应是由仪器来完成，同样的，扩增后结果的读取由仪器完成。
图2.5 转移管将样品注入到扩增管的过程。
在整个反应过程中，有两个地方使用到了反应试剂，一个是样品管内使用了裂解细胞或病毒的裂解液，另外一个是扩增管中使用了恒温扩增所需要的试剂，根据Alere官网介绍，Alere i测试盒是采用切口延伸扩增技术（Nicking Enzyme Amplification Reaction，NEAR）来检测病毒核酸，使用特定捕获酶来驱动扩增反应，该试剂一般包括有切口酶，前向模板核酸，反向模块核酸和聚合酶等。
（实际上，该产品并不是采用微流控技术来制备的，或者说和微流控没有半点关系，同时该产品也只是一种半自动POCT仪器，毕竟还需要几步手工操作，而且只适合于呼吸道拭子或人咽拭子等简单的样品，但该产品还是有些亮点的，比如检测非常快，十几分钟便得出结果，仪器小巧方便等，故拿出来和大家分享下。）
郑重声明：本网所有文章（包括图片和音视频资料）系出于传递更多信息之目的，且明确注明来源和作者。不希望被转载的媒体或个人可与我们联系，我们将立即进行删除处理。所有文章版权归原作者所有,且仅代表作者观点，不代表本站立场。如作者信息标记有误，请第一时间联系我们修改或删除，谢谢。