单克隆抗体制备
(Monoclonal Antibody Production)
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技术待认领

技术概述

        单克隆抗体(Monoclonal Antibody, mAb)是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。与多克隆抗体相比,单克隆抗体具有更好高的亲和力和特异性,在生物医学研究、疾病诊断和某些疾病治疗(如传染病和癌症)中起到重要作用。

(资料来源:百度百科)

技术详情

单克隆抗体制备技术
      单克隆抗体制备技术有有三种,分别为杂交瘤技术(Hybridoma Technology)、噬菌体展示技术(Phage Display Technology)和单B细胞技术(Single B Cell Technology)。目前本平台单克隆抗体制备技术主要为杂交瘤技术。
       杂交瘤技术是将抗原免疫小鼠的B细胞与骨髓瘤细胞进行融合形成杂交瘤细胞,经选择性培养和克隆化筛选,获得能够稳定分泌单一特异性抗体的杂交瘤细胞株,最终通过规模化培养和纯化制备目标单克隆抗体。适用于常规单克隆抗体制备(如科研试剂、诊断抗体)和需保留天然抗体结构的应用(如功能性研究)。其优点是:
(1)稳定性高,杂交瘤细胞可长期传代,实现抗体持续生产;
(2)技术成熟,已广泛应用于科研,诊断以及抗体药物发现;
(3)多功能性,可工程化改造,优化抗体性能或赋能新功能。
       噬菌体展示技术是将抗体可变区基因片段插入噬菌体基因组,使其以scFv(单链抗体)或Fab片段的形式展示在噬菌体表面。通过固相化抗原进行多轮“吸附-洗脱-扩增”淘选过程,富集高亲和力特异性抗体,最终获得目标单克隆抗体。适用于生物制药(如疫苗设计、药物开发)和高亲和力抗体筛选。其优点是:
(1)多样性,天然噬菌体库容量可达1011,覆盖更广的抗原表位;
(2)周期短,无免疫和细胞融合等步骤,实验周期缩短。
       单B细胞抗体技术利用单个B细胞仅表达单一功能性重链和轻链基因的特性,通过流式分选或微流控技术分离抗原特异性B细胞,并采用单细胞PCR扩增其抗体可变区基因,经重组表达后获得具有天然配对结构的单克隆抗体。适用于疾病中和抗体开发。其优点是:
(1)天然配对,保留原始轻重链组合,抗体亲和力与特异性更优;
(2)高通量,结合流式筛选技术,能够快速,准确获得大量阳性B细胞;
       平台提供的产品由具有15年抗体开发经验的工匠完成,技术路线成熟,产品质量稳定可靠、灵敏度极高,产品深受下游客户好评。
服务优势
(1)准——基于抗原分析系统与蛋白结构预测技术,精准设计最佳抗原方案,确保特异性;
(2)快——自主研发创新试剂(如快速佐剂、专用培养基)将开发周期从6个月缩短至3个月,且提升杂交瘤细胞稳定性;
(3)稳——实现抗原平台与抗体验证平台无缝衔接,提高项目成功率并加速交付;
(4)省心——推出“零预付,包成功”合作模式,承诺100%项目成功率,最大程度降低客户风险。
服务流程
方案沟通-合同签订-免疫原制备-动物免疫-细胞融合–细胞筛选-亚克隆筛选–抗体纯化-抗体验证-成果交付
交付内容
(1)3-5株杂交瘤细胞;
(2)>5mg纯化抗体;
(3)100μL 腹水原液;
(4)100μL免疫阳性血清;
(5)项目报告,包括抗原生产、杂交瘤构建、筛选、克隆化及其相关检测的整套数据;
(6)保证型单克隆抗体定制服务提供相应的内源性检测数据。(不成功不收费)。
案例展示

七次跨膜的线粒体内膜蛋白单克隆抗体

图1  ND4 2D9 大鼠肠组织 200倍

图2  ND4 2D9 小鼠肠组织 200倍

图3  Western blot结果

 

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