技术概述
纳米抗体即重链单域抗体VHH,具有高水溶性,高稳定性,易于工程化等优点。核心技术原理首先通过噬菌体展示技术建立一个超大容量的纳米抗体基因文库,再经过“吸附-洗涤-洗脱-扩增”的淘选环节,富集得到结合目标抗原的克隆,最后再对阳性单克隆测序分析等,筛选出针对特定靶点的纳米抗体。
技术详情
(1)丰富项目经验:深耕行业多年,我们拥有涵盖多物种、多靶点(包括困难靶点)的成熟项目经验,能为您提供从方案设计到结果交付的全流程专业支持。
(2)领先技术平台:依托先进的噬菌体展示文库与高效淘选技术,我们能筛选出的纳米抗体兼具纳摩尔级超高亲和力、卓越稳定性与优异的组织穿透性,并且品质经严格验证。
(3)显著成本优势:凭借优化的工艺与蛋白表达系统,我们能在保证高质量成果的同时将开发周期大幅缩短,并显著降低生产成本,为您大幅节省研发投入。
本案例是发表Cell Death Discovery期刊的一篇关于RBM47纳米抗体的论文,研究人员使用包含RBM47 ISG化位点(K329)的12氨基酸肽段(CKECVSNYOKAA)作为抗原表位,从合成的纳米抗体酵母表面展示库中筛选出特异性结合RBM47的纳米抗体(命名为 nbRBM47),再将nbRBM47与HERC5 E3连接酶的HECT结构域融合,构建成 nbRBM47-HECT 嵌合连接酶系统,实现了对RBM47蛋白的位点特异性ISG化精准操纵。功能验证揭示,该纳米抗体系统不仅能高效诱导RBM47发生ISG化,更能直接抑制关键免疫抑制因子TSC22D3的表达,从而在分子层面成功打通了“RBM47 ISG化下调TSC22D3”这条全新的免疫调控通路。

图A: 嵌合E3连接酶 (nbRBM47-HECT) 的设计示意图
图B: nbRBM47在293T细胞中诱导了RBM47的ISG化
图C、D: nbRBM47-HECT在A549细胞中抑制了TSC22D3的蛋白和mRNA表达
图E:敲低RBM47消除了nbRBM47-HECT对诱导RBM47 ISG化的作用
图F: bRBM47-HECT通过在野生型MEFs中诱导RBM47的ISG化来抑制TSC22D3表达,但在R/R型MEFs中无效
图G: nbRBM47-HECT对共转染UBE1L、UBCH8和ISG15的质粒的Jurkat T淋巴细胞的作用
(资料来源:罗绍祥)
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