耐药细胞株的建立实验是通过细胞与低剂量的药物长期接触，引起细胞本身生物化学过程的改变，细胞膜上出现Pgp（或P-170）糖蛋白，使细胞逐渐对药物耐受。随着药物浓度的递增，其耐受程度逐渐加强。

体内耐药细胞株建立：根据欲建立的耐药细胞株，选择合适的动物。在实验期间，一般选择同性别动物进行实验。

体外耐药细胞株建立：常见的瘤株均可，应依据研究目的、方向确定实验用瘤株，考虑到传代方便，且容易观察或检测，多选择腹水性肿瘤。采用体外低浓度梯度递增联合大剂量间断冲击方法诱导肿瘤细胞对药物产生耐药性。