技术概述
哺乳动物细胞表达系统是由哺乳动物细胞翻译后再加工修饰产生的外源蛋白，是生产天然蛋白的理想表达系统，也是应用最广泛地动物细胞表达系统。它的优势在于能指导蛋白质的正确折叠，提供复杂的N型糖基化和准确的O型糖基化等多种翻译后加工功能，它的表达产物接近于天然的高等生物蛋白质分子[1]。中国仓鼠卵巢CHO（Chinese hamster ovary）细胞在的哺乳类基因表达受体细胞应用最广泛[1]。CHO细胞表达外源基因产物在结构、糖基化类型和方式上与天然蛋白几乎相同，能正确组装多亚基蛋白，并能大规模培养[3]。哺乳动物细胞表达系统主要应用于生产单克隆抗体，生产尿激酶，生产促卵泡激素，制备基因工程药物等[4]。
技术详情
| 载体 | 启动子 | 报告基因/标签 | 原核抗性 | 筛选标记 | 备注 |
| pCDNA3.1(-) | CMV | / | 氨苄青霉素 | 新霉素/遗传霉素 | 可供构建 |
| pCDNA3.1(+) | CMV | / | 氨苄青霉素 | 新霉素/遗传霉素 | 可供构建 |
| pCDNA3.1(+)-flag | CMV | 3×FLAG | 氨苄青霉素 | 新霉素/遗传霉素 | 可供构建 |
| pCDNA3.1-V5-His | CMV | V5 ,His | 氨苄青霉素 | 新霉素/遗传霉素 | 可供构建 |
| pCDNA3.1-myc-His A | CMV | C-His,C-Myc | 氨苄青霉素 | 新霉素/遗传霉素 | 可供构建 |
| pCDNA3.0 | CMV | / | 氨苄青霉素 | 新霉素/遗传霉素 | / |
| pCDNA3-HA-N | CMV | N-HA | 氨苄青霉素 | 新霉素/遗传霉素 | / |
| pCDNA3.1-3×HA-C | CMV | C-3×HA | 氨苄青霉素 | 遗传霉素 | / |
| pCDNA3.1-3×FLAG-N | CMV | N-3×FLAG | 氨苄青霉素 | 新霉素 | / |
| pCDNA3.1(+)-Zeo | CMV | / | 氨苄青霉素 | 博来霉素 | / |
| pCDNA3.1-3×HA-N | CMV | N-3×HA | 氨苄青霉素 | 新霉素/遗传霉素 | / |
| pCDNA3.1-GST | CMV | C-GST | 氨苄青霉素 | 遗传霉素 | / |
| pCDNA3.1-HA-Hygro | HA | 氨苄青霉素 | 潮霉素 | / | |
| pCDNA3.1(-)-Myc-His A | CMV | C-6×His, C-Myc | 氨苄青霉素 | 新霉素 | / |
| pCDNA3.1(-)-Myc-His B | CMV | C-6×His, C-Myc | 氨苄青霉素 | 新霉素 | / |
| pCDNA3.1-Myc-HisB(+) | CMV | C-6×His,C-Myc | 氨苄青霉素 | 新霉素 | / |
| pcDNA3.1-V5-His B | CMV | C-6×His, C-V5 | 氨苄青霉素 | 新霉素 | / |
| pcDNA4-HisA | CMV | C-6×His, C-Xpress | 氨苄青霉素 | 博来霉素 | / |
| pCDNA6-Myc-HisB | CMV | C-myc,C-6×His | 氨苄青霉素 | 杀稻瘟菌素 | / |
（杨振平编辑；转导生物完善）
| 载体 | 启动子 | 报告基因/标签 | 原核抗性 | 筛选标记 | 备注 |
| pCMV-3Tag-8 | CMV | 3×FLAG | 氨苄青霉素 | / | 可供构建 |
| pCMV-Tag 2C | CMV | FLAG | 卡那霉素 | 新霉素 | 可供构建 |
| p3xFLAG-CMV-14 | CMV | C-3×flag | 氨苄青霉素 | 遗传霉素 | 可供构建 |
| pCS2+ | CMV | / | 氨苄青霉素 | / | 可供构建 |
| pCS2(+)-Flag | CMV | FLAG | 氨苄青霉素 | / | 可供构建 |
| pCS2(+)-HA | CMV | HA | 氨苄青霉素 | / | 可供构建 |
| pVAX1 | CMV,T7 | / | 卡那霉素 | 新霉素/遗传霉素 | 可供构建 |
| p3×FLAG-CMV-8 | CMV | N-3×FLAG | 氨苄青霉素 | / | / |
| pCMV-FLAG-C | CMV | C-3×FLAG | 氨苄青霉素 | / | / |
| p3xFLAG-Myc-CMV-24 | CMV | 氨苄青霉素 | 新霉素 | / | |
| pCMV-His-N | CMV | N-His | 氨苄青霉素 | / | / |
| pCMV-Tag 4A | CMV | C–FLAG | 卡那霉素 | 新霉素/遗传霉素 | / |
| pFLAG-CMV-6a | CMV | N-FLAG | 氨苄青霉素 | / | / |
| pNTAP-B | CMV | / | 卡那霉素 | 新霉素 | / |
| pTracer-CMV2 | CMV | / | 氨苄青霉素,博来霉素 | 博来霉素 | / |
| p3×FLAG-CMV-10 | CMV | N-3×FLAG | 氨苄青霉素 | 新霉素 | / |
| p3xFLAG-CMV-7.1 | CMV | N-3×FLAG | 氨苄青霉素 | 新霉素 | / |
| p3xFLAG-CMV-14 | CMV | C-3×FLAG | 氨苄青霉素 | 新霉素 | / |
| pCMV-LacZ | CMV | / | 氨苄青霉素 | / | / |
| pCMV-Tag 2B | CMV | N-Flag | 卡那霉素 | 新霉素 | / |
| pCMV-Tag 3B | CMV | C-myc | 卡那霉素 | 新霉素 | / |
| pCMV-Tag 4B | CMV | C-FLAG | 卡那霉素 | 新霉素 | / |
（杨振平编辑；转导生物完善）
| 载体 | 启动子 | 报告基因/标签 | 原核抗性 | 筛选标记 | 备注 |
| pIRESneo3 | CMV | / | 氨苄青霉素 | 新霉素 | / |
| pIRESneo | CMV | / | 氨苄青霉素 | 新霉素 | / |
（转导生物编辑）
载体 | 启动子 | 报告基因/标签 | 原核抗性 | 筛选标记 | 备注 |
pCAG.OSF | CAG | / | 氨苄青霉素 | / | / |
pHLmMBP-10 | CAG | MBP,C-6×His,C-HA | 氨苄青霉素 | / | / |
pCAG-IRES-Puro | CAG | IRES | 氨苄青霉素 | 嘌呤霉素 | / |
pCAGIG | CAG | EGFP | 氨苄青霉素 | / | / |
pCIG | CAG | EGFP | 氨苄青霉素 | / | / |
pCAGGS-Myc | CAG | N-Myc | 氨苄青霉素 | / | / |
pCAG-GFP | CAG | C-EGFP | 氨苄青霉素 | / | / |
pCAGGS-HA | CAG | N-HA | 氨苄青霉素 | / | / |
（转导生物编辑）
| 载体 | 启动子 | 报告基因/标签 | 原核抗性 | 筛选标记 | 备注 |
| pEF1-Myc-HisB | EF-1α | C-6×His,C-MYC | 氨苄青霉素 | 遗传霉素 | / |
| pEF4-V5-HisA | EF-1α | C-V5,C-6×His | 氨苄青霉素 | 博来霉素 | / |
| pEF-GFP | EF-1α | C-EGFP | 氨苄青霉素 | / | / |
| pEF1/V5-HisA | EF-1α | C-V5,C-6×His | 氨苄青霉素 | 新霉素 | / |
（转导生物编辑）
| 载体 | 启动子 | 报告基因/标签 | 原核抗性 | 筛选标记 | 备注 |
| pENTR5-UbCp | UbC | / | 卡那霉素 | / | / |
| pcDNA3.1-ccdB-3xFLAG-V5 | CMV | 3xFLAG,V5 | 氨苄青霉素 | 潮霉素 | / |
| pN3 | CMV | / | 卡那霉素 | 新霉素 | / |
（转导生物编辑）
| 载体 | 启动子 | 报告基因/标签 | 原核抗性 | 筛选标记 | 备注 |
| pACGFP1-N1 | CMV | C-GFP | 卡那霉素 | 新霉素/遗传霉素 | 可供构建 |
| pCAG-IRES-EGFP | chicken β-actin | EGFP | 氨苄青霉素 | / | 可供构建 |
| pCDNA3.1-EGFP | CMV | EGFP | 氨苄青霉素 | 新霉素/遗传霉素 | 可供构建 |
| pCMV-C-mCherry | CMV | C-mCherry | 卡那霉素 | 新霉素 | 可供构建 |
| pDsRed-Monomer-N1 | CMV | DsRed | 卡那霉素 | 新霉素 | 可供构建 |
| pEGFP-N3 | CMV | C-EGFP | 卡那霉素 | 新霉素 | 可供构建 |
| pEGFP-C1 | CMV | N-EGFP | 卡那霉素 | 新霉素/遗传霉素 | 可供构建 |
| pEGFP-N1 | CMV | C-EGFP | 卡那霉素 | 新霉素/遗传霉素 | 可供构建 |
| pIRES2-EGFP | CMV | EGFP | 卡那霉素 | 新霉素/遗传霉素 | 可供构建 |
| pIRES2-GFP | CMV | EGFP | 氨苄青霉素 | 遗传霉素 | 可供构建 |
| pTurboGFP | CMV | C-GFP | 卡那霉素 | 新霉素/遗传霉素 | 可供构建 |
| pIRES2-DsRed-Express | CMV | DsRed | 卡那霉素 | 新霉素 | 可供构建 |
| p2A-DsRed-Express | CMV | DsRed | 卡那霉素 | 新霉素 | 可供构建 |
| pAcGFP1-1 | CMV | C-AcGFP1 | 卡那霉素 | 新霉素/遗传霉素 | / |
| pCAG-DsRed1 | chicken β-actin | DsRed1 | 氨苄青霉素 | / | / |
| pDsRed-Express2-N1 | CMV | C-DsRed2 | 卡那霉素 | 新霉素/遗传霉素 | / |
| pDsRed2-ER | CMV | N-DsRed2 | 卡那霉素 | 新霉素/遗传霉素 | / |
| pDsRed2-N1 | CMV | C-DsRed2 | 卡那霉素 | 新霉素/遗传霉素 | / |
| pDsRed2-C1 | CMV | N-DsRed2 | 卡那霉素 | 新霉素/遗传霉素 | / |
| pDsRed2-Mito | CMV | N-DsRed2 | 卡那霉素 | 新霉素/遗传霉素 | / |
| pDsRed2-Nuc | CMV | DsRed2 | 卡那霉素 | 新霉素 | / |
| pDsRed2-Peroxi | CMV | N-DsRed2,C-peroxi | 卡那霉素 | 新霉素/遗传霉素 | / |
| pEYFP-N1 | CMV | EYFP | 卡那霉素 | 新霉素 | / |
| pEYFP-Mem | CMV | EYFP | 卡那霉素 | 新霉素 | / |
| pEBFP2-N1 | CMV | EBFP2 | 卡那霉素 | 遗传霉素 | / |
| pEBFP-C1 | CMV | N-EBFP | 卡那霉素 | 新霉素/遗传霉素 | / |
| pGL4.51 | CMV | Luc2 | 氨苄青霉素 | 新霉素 | / |
| pmCherry-N1 | CMV | mCherry | 卡那霉素 | 新霉素 | / |
| pmCherry-C1 | CMV | mCherry | 卡那霉素 | 新霉素 | / |
| pmGeos-M-C1 | CMV | mEos2 | 卡那霉素 | 新霉素 | / |
| pmGeos-M-N1 | CMV | mEos2 | 卡那霉素 | 新霉素 | / |
| pmKO2-N1 | CMV | mKO2 | 卡那霉素 | 新霉素 | / |
| pMyosin-PSmOrange | CMV | PSmOrange | 卡那霉素 | 新霉素 | / |
| ptdTomato-C1 | CMV | N-tdTomato | 卡那霉素 | 新霉素/遗传霉素 | / |
| ptdTomato-N1 | CMV | C-tdTomato | 卡那霉素 | 新霉素 | / |
| pTagBFP-N | CMV | TagBFP | 卡那霉素 | 新霉素 | / |
（转导生物编辑）
| 载体 | 启动子 | 报告基因/标签 | 原核抗性 | 筛选标记 | 备注 |
| pCMV/myc/ER | CMV | c-Myc | 氨苄青霉素 | 新霉素 | / |
| pCMV/myc/nuc | CMV | c-Myc | 氨苄青霉素 | 新霉素 | / |
| pDsRed2-3×NLS | CMV | DsRed2 | 卡那霉素 | 遗传霉素 | / |
| pEBFP-3×NLS | CMV | EBFP2,3×NLS | 卡那霉素 | 新霉素/遗传霉素 | / |
| pEGFP-3×NLS | CMV | C-GFP | 卡那霉素 | 遗传霉素 | / |
| pEGFP-Actin | CMV | GFP | 卡那霉素 | 遗传霉素 | / |
| pEYFP-Golgi | CMV | EYFP | 卡那霉素 | 新霉素 | / |
| pEYFP-Mem | CMV | EYFP | 卡那霉素 | 新霉素 | / |
| pEYFP-tub | CMV | EYFP | 卡那霉素 | 新霉素 | / |
| pDsRed2-Mito | CMV | DsRed2 | 卡那霉素 | 新霉素 | / |
| pKillerRed-mem | CMV | C-mem, C-KillerRed | 卡那霉素 | 新霉素 | / |
（转导生物编辑）
| 载体 | 启动子 | 报告基因/标签 | 原核抗性 | 筛选标记 | 备注 |
| PiggyBac Dual promoter | CMV | GFP | 氨苄青霉素 | 嘌呤霉素 | / |
| Super PiggyBac Transposase | Polr2A | / | 氨苄青霉素 | / | / |
| pTol2-Promoter-T2A-EGFP | ZB-actin | C-GFP | 卡那霉素 | 新霉素 | / |
| pT2-VENUS | T3，T7，chicken β-actin | / | 氨苄青霉素 | / | / |
（转导生物编辑）
| 载体 | 启动子 | 报告基因/标签 | 原核抗性 | 筛选标记 | 备注 |
| pGenesil-1 | U6 | EGFP | 卡那霉素 | 遗传霉素 | 可供构建 |
| pCDNA6.2-GW–EmGFP-miR-Control | CMV | N-GFP | 壮观霉素 | 杀稻瘟菌素 | / |
| pSD1211-U6-shRNA | CMV，U6 | AcGFP1 | 氨苄青霉素 | 新霉素 | / |
| pSilencer 1.0-U6 | U6 | / | 氨苄青霉素 | / | / |
| pSilencer3.1-H1-Stuffer-Hygro | H1 | / | 氨苄青霉素 | 潮霉素 | / |
| pSilencer4.1-CMV puro-Stuffer | CMV | / | 氨苄青霉素 | 嘌呤霉素 | / |
（转导生物编辑）
| 载体 | 启动子 | 报告基因/标签 | 原核抗性 | 筛选标记 | 备注 |
| pACT | CMV | / | 氨苄青霉素 | 新霉素 | / |
| pACT-MyoD | CMV | / | 氨苄青霉素 | 新霉素 | / |
| pBIND | CMV | / | 氨苄青霉素 | / | / |
| pBIND-Id | CMV | / | 氨苄青霉素 | / | / |
| pBD-p53 | CMV | / | 卡那霉素 | 新霉素 | / |
| pCMV-AD | CMV | / | 氨苄青霉素 | / | / |
| pCMV-BD | CMV | Gal4-DBD | 卡那霉素 | 新霉素 | / |
（转导生物编辑）
| 载体 | 启动子 | 报告基因/标签 | 原核抗性 | 筛选标记 | 备注 |
| pOPRSVI | CMV | / | 氨苄青霉素 | 新霉素 | / |
| pCMVLacI | CMV | / | 氨苄青霉素 | 潮霉素 | / |
（转导生物编辑）
| 载体 | 启动子 | 报告基因/标签 | 原核抗性 | 筛选标记 | 备注 |
| pcDNA5–FRT–TO | CMV/TetO2 | / | 氨苄青霉素 | 潮霉素 | / |
| pCMV-Tet3G | CMV | / | 氨苄青霉素,卡那霉素 | 新霉素 | / |
| pTK-hyg | HSV TK | / | 氨苄青霉素 | 潮霉素 | / |
| pTet-tTAK | Tet | / | 氨苄青霉素 | / | / |
| pTet-Splice | Tet | / | 氨苄青霉素 | / | / |
| pTet-Off | CMV | / | 氨苄青霉素 | 新霉素 | / |
（转导生物编辑）
参考文献
1. Expression systems for heterologous proteinproduction[J]. Bio Pharm, 1989, 2:1.
2. 张军要等. 中国仓鼠卵巢细胞高效表达系统研究进展[J]. 新乡医学院学报，2010，27：523-526.
3. 张国强等. 哺乳动物细胞高效表达载体的优化[J]. 生物技术通讯, 2006, 17: 692-695.
4. Khan KH et al.Gene expression in Mammalian cells and its applications[J]. Adv Pharm Bull, 2013, 3: 257-263.
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