酶联免疫吸附测定
(Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)
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技术概述

酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay)(简写ELISA)指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于定量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。

抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在这种测定方法中有3种必要的试剂:①固相的抗原或抗体(免疫吸附剂) ②酶标记的抗原或抗体(标记物)③酶作用的底物(显色剂)。测量时,抗原(抗体)先结合在固相载体上,但仍保留其免疫活性,洗涤后加入待检测蛋白,洗涤后再加入一种抗体(抗原)与酶结合成的偶联物(标记物),此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性,当偶联物与固相载体上的抗原(抗体)反应结合后,最后再加上酶的相应底物,即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。

在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。可以采用双抗夹心法或者竞争法对抗原进行定性或者定量检测,用间接法对抗体进行检测定性或定量检测,具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。

(资料来源:爱博泰克)

技术详情

(XXX编辑,XXX修善)

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