哺乳动物表达载体构件
2019年8月22日
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哺乳动物细胞表达系统是由哺乳动物细胞翻译后再加工修饰产生的外源蛋白，是生产天然蛋白的理想表达系统，也是应用最广泛地动物细胞表达系统。
哺乳动物细胞表达系统是由哺乳动物细胞翻译后再加工修饰产生的外源蛋白，是生产天然蛋白的理想表达系统，也是应用最广泛地动物细胞表达系统。
植物表达载体在植物基因工程中起着至关重要的作用，构建植株表达载体主要目的是将目的基因进行修饰改造，使其转入受体植物后的表达符合目的需要。
双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation，BiFC)分析技术，是由Hu等在2002年最先报道的一种直观、快速地判断目标蛋白在活细胞中的定位和相互作用的新技术。
启动子载体，据启动子序列特性，从基因组中调取启动子序列，将其构建至报告基因载体中，通过检测报告基因来分析启动子关键区域；同时可以通过构建一系列截短体启动子和定点突变可以确定关键的转录因子结合位点。
CRISPR Cas9为新型的基因组编辑技术，拥有操作简单，效率高，以及作用靶点多等优势，逐渐成为基因敲除，基因组突变和基因敲除等实验的标准操作工具。Cas9系统能在293T, K562, iPS等多种细胞中，进行有效的靶向酶切，
RNA 干扰（RNA interference, RNAi）技术，是将与内源mRNA 编码区同源的小片段（19~23 bp）外源双链 RNA（siRNA）导入细胞中，引发细胞中相应mRNA 高效特异性降解，从而导致特定基因表达沉默（knock down）的一种实验技术。
表达载体（Expression vectors）就是在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件（如启动子、RBS、终止子等），使目的基因能够表达的载体。如表达载体pKK223-3是一个具有典型表达结构的大肠杆菌表达载体。
原核表达系统是将外源cDNA片段克隆到原核表达载体上然后转化表达菌株，在原核生物来表达外源蛋白的系统，主要包括大肠杆菌表达、枯草芽孢杆菌表达、链霉素表达等。