文库构建-差减文库
差减文库 ( Subtractive cDNA library) 也称扣除文库、差减cDNA文库、抑制性消减文库(Suppression Subtractive hybridization, SSH)。减法杂交的本质是除去那些普遍共同存在的cDNA序列,从而使欲分离的目的基因的序列得到有效的富集,提高了分离的敏感性。
差减文库 ( Subtractive cDNA library) 也称扣除文库、差减cDNA文库、抑制性消减文库(Suppression Subtractive hybridization, SSH)。减法杂交的本质是除去那些普遍共同存在的cDNA序列,从而使欲分离的目的基因的序列得到有效的富集,提高了分离的敏感性。
cDNA 文库(cDNA library ): 是指某种生物基因组转录的全部mRNA经反转录产生的cDNA片段分别与克隆载体(常用噬菌体或质粒载体)重组,并将其引入到相应的宿主细胞中(一般为E.coli.)繁殖和扩增,则每个细菌含有一段cDNA,
gDNA文库即基因组DNA(genomic DNA)文库,又称基因组文库(Genomic Library),把某种生物基因组的全部遗传信息通过克隆载体贮存在一个受体菌克隆子群体中,这个群体即为这种生物的基因组文库。
全基因合成 (Gene synthesis),也称基因合成,即基因人工合成,是重要的基因获取手段之一,是指利用生物化学的方法将人工合成的寡核苷酸拼接成基因的一种技术。
TA克隆(TA cloing)是一种将PCR产物直接连接到T克隆载体的方法。TA克隆技术是利用了Taq聚合酶具有末端转移酶(TdT)活性,但却不具有3’-5’端外切酶校准活性的特点,可在PCR产物的3’末端加上一个非模板依赖的dA。
染色体步移(Chromosome walking),又称为基因组步移(Genome walking),是指由生物基因组或基因组文库中的已知序列出发,逐步探知其旁邻的未知序列或与已知序列呈线性关系的目标序列的方法。
核酸是指DNA和RNA,高质量的核酸是所有分子生物学实验的基础。核酸提取服务可以快速地从动植物组织、细菌、真菌、细胞中提出高质量的DNA或RNA,以用于PCR、分子标记、基因杂交等各种科学研究。