siRNA是19-23nt的双链RNA小分子,这种小分子在细胞中首先被一种称为Dicer的RNA酶切割,随后与细胞中的某些酶和蛋白质形成RNA诱导沉默复合体(RNA-induced silencing complexes , RISCs),进而解开双链并通过反义链与细胞内mRNA分子发生特异性结合,导致mRNA分子降解,从而抑制特定基因的表达。
MicroRNA(miRNA)是一类内生的、长度约20-24个核苷酸的小RNA,是发夹结构的约70-90个碱基大小的单链RNA前体经过Dicer酶加工后生成。
dsRNA 可以通过注射、电穿孔和化学试剂介导的转染等方式介入动物和细胞内。dsRNA的制备是实施RNAi较为关键的一步。目前常用的dsRNA制备方法主要有2 种:体外转录法和体内载体表达法。其中体外转录法合成dsRNA可以在预期的PCR产物两端连上转录起始点(如T7、SP6等),先用RNA聚合酶转录合成单链RNA, 再互补成dsRNA。