细胞克隆形成实验
2019年6月18日
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细胞克隆形成率即细胞接种存活率，表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆，而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。
细胞克隆形成率即细胞接种存活率，表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆，而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。
短串联重复(Short tandem repeats, STR)，又称微卫星DNA(Microsatellite DNA)或简单重复序列(Simple repeat sequence, SRS或SSR)，是广泛存在于原核生物和真核生物基因组中的核苷酸重复序列。
上皮细胞，癌细胞，角质细胞，在生理状态下，形成单层或者复层上皮，当病理状态下，比如创伤愈合，细胞迁移的时候，以侧向运动为主，划痕实验很好的模拟了这种运动形式。细胞划痕是测定肿瘤细胞的运动特性的方法之一，
细胞分离技术包括离心技术、流式细胞术和细胞电泳。离心是研究如细胞核、线粒体、高尔基体、溶酶体和微体，以及各种大分子基本手段。流式细胞术是对单个细胞进行快速定量分析与分选的一门技术。
细胞冻存和细胞复苏实验的基本原则是慢冻快融，实验证明这样能够大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存大多数都采用甘油或二甲基亚砜作保护剂，这两种物质能提升细胞膜对水的通透性，加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外，减少细胞内冰晶的形成，从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。
通过荧光标记抗体和流式细胞术检测，细胞表面标记（cell surface marker）能够用来确定细胞亚群，基于来源，发育阶段和功能。
抗原通常是由多个抗原决定簇组成的，由一种抗原决定簇刺激机体，由一个B淋巴细胞接受该抗原刺激所产生的抗体称之为单克隆抗体（Monoclonal Antibody）。由多种抗原决定簇刺激机体，相应地就产生各种各样的单克隆抗体，这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体，
胶体金技术是以胶体金作为示踪物来反映蛋白之间的反应情况的一种技术，通过肉眼即可判读检测结果，简单方便，从加样到判读结果一般在10分钟左右。最经典的胶体金技术为早早孕试纸条检测，采用双抗体夹心法制作。
免疫分型可对免疫细胞的类型、功能等进行快速鉴定。 流式细胞仪可用于多参数淋巴细胞亚群计数、免疫表型分析，辅助性T淋巴细胞分化功能研究，新细胞亚群鉴定，疾病相关的特异性亚群鉴定和细胞表面标志物检测等实验。
传统上，根据胞外或表面表达的标志物不同，流式细胞术可用于鉴定多种细胞汇集池内不同的细胞类型，这种应用通常称为免疫表型分型。然而，这项技术还可轻松地应用于胞内靶标检测，并可成功地应用于复杂信号转导事件的研究。
通过将着床前阶段的胚胎细胞转移到培养皿的培养基中，通常使用一层小鼠胚胎皮肤细胞作为饲养层。饲养细胞为胚胎干细胞提供了附着位置并且可以释放营养物质到培养基中。
磁珠分选是借助偶联在磁性微粒上抗体高特异性识别并标记目标细胞表面抗原，再让混有磁珠的细胞悬液通过磁场，结合了磁珠的细胞被吸附在磁场侧壁上，而未结合的细胞被除去，得到纯化的目标细胞，从而实现高效的分选与富集。
细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上 标记的dUTP ，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，
细胞运动性的研究，尤其是在肿瘤细胞的侵袭转移中应用很广泛。肿瘤转移是恶性肿瘤生物学特征之一，在肿瘤转移过程中的某些阶段，肿瘤细胞表现出较强的运动能力，如肿瘤细胞从原发瘤灶分离，进而侵入到邻近组织及再穿过血管壁进入血液循环和穿出血管壁进入继发部位等，因而细胞运动性的研究在弄清肿瘤细胞侵袭和转移的机制上有重要地位。
免疫沉淀（immunoprecipitation）是一种纯化蛋白质的方法。将目标蛋白的抗体与细胞提取物一起孵育，使抗体与溶液中的蛋白质结合。然后利用蛋白 A/G 偶联的琼脂糖微珠从溶液中分离出抗体/抗原复合物，从而将目标蛋白质从复杂样品中分离出来。
免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物，再用这种荧光抗体（或抗原）作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原（或抗体）。
3D细胞培养技术是指将具有三维结构不同材料的载体与各种不同种类的细胞在体外共同培养，使细胞能够在载体的三维立体空间结构中迁移、生长，构成三维的细胞载体复合物。
大型动物多为皮下或肌肉免疫，但是初次免疫都建议在皮下进行。可使用小分子、多肽、修饰多肽、蛋白、融合蛋白、修饰蛋白等作为抗原进行多克隆抗体制备。使用山羊或者绵阳，年龄约6-10个月，体重25Kg左右。免疫计量根据抗原品系而定。
抗体抗原刺激机体，产生免疫学反应，由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白，这就是免疫球蛋白，这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。
抗体抗原刺激机体，产生免疫学反应，由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白，这就是免疫球蛋白，这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。